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感受态细胞有何特点?如何保证它的质量?(感受态细胞)

导读 大家好,我是小十,我来为大家解答以上问题。感受态细胞有何特点?如何保证它的质量?,感受态细胞很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!...

大家好,我是小十,我来为大家解答以上问题。感受态细胞有何特点?如何保证它的质量?,感受态细胞很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!

1、感受态细胞(competent cell):理化方法诱导细胞,使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态。

2、 、   CaCl2法:   操作:    1.将快速生长的大肠杆菌置于经低温(0℃)预处理的低渗氯化钙溶液中,便会造成细胞膨胀,细胞膜通透性发生变化,极易与外源DNA相粘附并在细胞表面形成复合物。

3、   2.此时,将该体系转移到42℃下做短暂的热刺激(90s),外源DNA就可能被细胞吸收。

4、进入细胞的外源DNA分子通过复制、表达,实现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的遗传性状。

5、   3.将转化后的细胞在选择性培养基上培养,筛选出带有外源DNA分子的阳性克隆。

6、   意义:   将构建好的载体转入感受态细胞进行表达,不仅可以检验重组载体是否构建成功,最主要的是感受态细胞作为重组载体的宿主可以进行后续实验,如蛋白质表达纯化等工作。

本文到此讲解完毕了,希望对大家有帮助。