大家好，我是小五，我来为大家解答以上问题。无菌操作的原则和注意事项，无菌操作很多人还不知道，现在让我们一起来看看吧！

1、无菌操作原则 一、在执行无菌操作时，必须明确物品的无菌区和非无菌区。

2、 二、执行无菌操作前，先戴帽子、口罩、洗手，并将手擦干，注意空气和环境清洁。

3、 三、夹取无菌物品，必须使用无菌持物钳。

4、 四、进行无菌操作时，凡未经消毒的手、臂、均不可直接接触无菌物品或超过无菌区取物。

5、 五、无菌物品必须保存在无菌包或灭菌容器内，不可暴露在空气中过久。

6、无菌物与非无菌物应分别放置。

7、无菌包一经打开即不能视为绝对无菌，应尽早使用。

8、凡已取出的无菌物品虽未使用也不可再放回无菌容器内。

9、 六、无菌包应按消毒日期顺序放置在固定的柜橱内，并保持清洁干燥，与非灭菌包分开放置，并经常检查无菌包或容器是否过期，其中用物是否适量。

10、 七、无菌盐水及酒精、新洁尔灭棉球罐每周消毒一次，容器内敷料如干棉球、纱布块等，不可装得过满，以免取用时碰在容器外面被污染。

11、 无菌操作技术及注意事项　　玻璃器皿的消毒和清洁 　　⑴新购玻璃器皿的处理新购玻璃器皿应用热肥皂水洗刷，流水冲洗，再用1％～2%盐酸溶液浸泡，以除去游离碱，再用水冲洗。

12、对容量较大的器皿如试剂瓶、烧瓶或量具等，经清水洗净后应注入浓盐酸少许，慢慢转动，使盐酸布满容器内壁数分钟后倾出盐酸，再用水冲洗。

13、 　　⑵污染玻璃器皿的处理 　　①一般试管或容器可用3％煤酚皂溶液或5％石炭酸浸泡，再煮沸30分钟，或在3％～5％漂白粉澄清液内4小时，有的亦可用肥皂或合成洗涤剂洗刷使尽量产生泡沫，然后用清水冲洗至无肥皂为止。

14、最后用少量蒸馏水冲洗。

15、 　　②细菌培养用的试管和培养皿可先行集中，用1kg/cm2高压灭菌15～30分钟，再用热水洗涤后，用肥皂洗刷，流水冲洗。

16、 　　③吸管使用后应集中于3%煤酚皂溶液中浸泡24小时，逐支用流水反复冲洗，再用蒸馏水冲洗。

17、 　　④油蜡沾污的器皿，应单独灭菌洗涤，先将沾有油污的物质弃去，倒置于吸水纸上，100℃烘干半小时，再用碱水煮沸，肥皂洗涤，流水冲洗。

18、必要时可用二甲苯或汽油去油污。

19、 　　⑤染料沾污的器皿，可先用水冲洗，后用清洁或稀盐酸洗脱染料，再用清水冲洗。

20、一般染色剂呈碱性，所以不宜用肥皂的碱水洗涤。

21、 　　⑥玻片可置于3％煤酚皂溶液中浸泡，取出后流水冲洗，再用肥皂或弱碱性煮沸，自然冷却后，流水冲洗。

22、被结核杆菌污染或不易洗净的玻片，可置于清洁液内浸泡后再冲洗。

23、 　　2、无菌器材和液体的准备将玻璃器具中的培养皿、培养瓶、试管、吸管等按上述方法洗净烘干后，用一洁净纸包好瓶口并把吸管尾端塞上棉花，装入干净的铝盒或铁盒中，于120℃的干燥箱中干燥灭菌２小时，取出备用。

24、对于手术器械、瓶塞、工作服以及新配制的PBS洗液，则采用高压蒸气灭菌法，即在15磅的条件下，加热20分钟。

25、而对于MEM培养液、小牛血清和消化液等需用G5或G6滤器负压抽滤后使用。

26、 　　3、无菌操作过程在无菌操作过程中，最重要的是要保持工作区的无菌、清洁。

27、因此，在操作前20～30分钟要先启动超净台和紫外灯，并认真洗手和消毒。

28、在操作时，严禁喧哗，严禁用手直接拿无菌物品，如瓶塞等，而必须用消毒的止血钳、镊子等。

29、培养瓶应在超净台内操作，并且在开启和加盖瓶塞时需反复用酒精灯烧。

30、对于吸管应先用手拿后1/3处，戴上胶皮乳头，并用酒精灯烧烤之后再吸液体。

31、 　　4、常用清洁液的配制法⑴重铬酸钾清洁液：可根据不同需要，选用下列的任何一种浓度。

32、先将重铬酸钾溶于水中，再慢慢加入浓硫酸。

33、注意，此时可产生高热，应防止容器破裂。

34、重铬酸钾清洁液除污力强，腐蚀性大，应避免接触皮肤和衣服。

35、为防止吸收空气的水分而变质，此液应贮存于带盖的容器中。

36、如清洁效力较差，可再加入少量重铬酸钾及浓硫酸，还可继续使用。

37、直到液体变蓝绿色，即不能再用。

38、配制重铬酸钾清洁液时，宜用耐高温的陶瓷缸或耐酸搪瓷或塑料容器。

39、使用玻璃器皿时，应特别注意防止产生高热而破裂，切忌用量筒来配制。

40、 　　⑵磷酸三钠将其配成5％～10％水溶液，可用于洗涤玻璃器皿上的油污，但经常使用腐蚀玻璃，使器皿表面模糊、毛糙。

41、 　　⑶硝酸清洁液将其配成50％水溶液，可用于清洁微量滴定筒。

42、⑷乙二胺四乙酸二钠（EDTA钠盐）将其配成5％～10%水溶液，可洗脱粘附于玻璃器皿内壁的白色沉淀物。

43、⑸尿素溶液尿素是溶解蛋白质的良好溶剂，适用于洗涤粘附有血液血清等蛋白质的吸管、试管等。

本文到此讲解完毕了，希望对大家有帮助。